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BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法)
标题:BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法)
型号:BSB07M1
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    产品简介

        RT-PCR是指利用逆转录酶将RNA逆转录(RT)成cDNA(Complementary DNA),然后以cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增目的片段的技术。RT-PCR技术可用于检测细胞和组织中基因表达水平,克隆特定基因的cDNA序列和检测RNA病毒。
        不同于两步法RT-PCR中RT和PCR分别在两个反应体系中进行的方法,BioRT逆转录扩增(RT-PCR) 试剂盒(一步法)采用一步法使RT和PCR在同一反应体系中进行,反应过程中不需要添加试剂。本试剂盒采用美国先进技术生产的高质量逆转录酶(AMV酶)和热启动Taq聚合酶,并采用特殊的反应体系保证AMV逆转录酶和热启动Taq酶发挥最大功效。AMV逆转录酶可逆转录得到高产量的cDNA,热启动Taq聚合酶采用高度纯化的重组Taq聚合酶和单克隆抗体相结合,两者配合使用可得到长达4kb的产物。
        本试剂盒采用一步法进行,即RT和PCR分别在同一管中进行,反应过程中无需打开管盖,避免了交叉污染,同时具有高特异性,高灵敏,使用方便等特点。


    一步法RT-PCR示意图

     

     

     

    应用实例

    梯度稀释RNA模板用BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法)进行RT-PCR后电泳结果(450bp)

    1 μg mouse liver total RNA分别用BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法),I公司一步法RT-PCR试剂盒和P公司一步法RT-PCR试剂盒在50℃和55℃进行RT-PCR后电泳结果

    1 μg mouse liver total RNA用BioRT逆转录扩增(RT-PCR)试剂盒(一步法)进行RT-PCR后电泳结果

    参考文献

    1.Houts, G.E., Miyagi, M., Ellis, C., Beard, D., and Beard, J.W. (1979) J.Virol. 29(2):517-522.
    2.Guide to Molecular Cloning Techniques. Methods in Enzymology, Volume 152. pp 316-325. Edited by Shelby Berger and Alan R. Kimmel. Academic Press, Inc.
    3. Aatsinki JT, Lakkakorpi JT, Pietila EM, Rajaniemi HJ. Biotechniques. 1994 ;16(2):282-4, 286-8.
    4.F. X. LIMBACH, B. JAULHAC, Y. PIE′ MONT, J. L. KUNTZ, H. MONTEIL, AND J. SIBILIA. J Clin Microbiol. 1999. 2037–2039.
     

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